长高计算公式25格×16格的血球计数板使用juli举例

2020年10月15日发(作者：汤光恢)

6.(2018·江苏高考·T31)酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半,可作为饲 料蛋
白的来源。有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养,这样既可减少污染
又可降低生 产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母,并进行大量培养。
如图所示为操作流程,请回答下列问 题:

(1)配制培养基时,按照培养基配方准确称量各组分,将其溶解、定容后,调节培养
基的________,及时对培养基进行分装,并进行________灭菌。
(2)取 步骤②中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中,在步骤③中将温
度约________(在25 ℃、50 ℃或80 ℃中选择)的培养基倒入培养皿混匀,冷凝
后倒置培养。
(3)挑取 分离平板中长出的单菌落,按步骤④所示进行划线。下列叙述合理的有
________。
a.为保证无菌操作,接种针、接种环使用前都必须灭菌
b.划线时应避免划破培养基表面,以免不能形成正常菌落
c.挑取菌落时,应挑取多个菌落,分别测定酵母细胞中甲醇的含量
d.可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓
度,获得甲醇高耐受株
(4)步骤⑤中,为 使酵母数量迅速增加,培
养过程中需保证充足的营养和________
供应。为监测酵母的活 细胞密度,将发酵
液稀释1 000倍后,经等体积台盼蓝染液
染色,用25×16型血细胞计 数板计数5个
中格中的细胞数,理论上________色细胞

的个数应不少于 ____________,才能达到每毫升3×10
9
个活细胞的预期密度。
9
(X80)*400*10000*1000*2=
3×10

X=30

25格×16格的血球计数板使用方法
血球计数板介绍用优质厚 玻璃制成。每块计数板由H形凹槽分为2个同样的计数池。计
数池两侧各有一支持柱，将特制的专用盖玻
片覆盖其上，形成高0.10mm的计数池。计
数池画有长、宽各3.0mm的方格，分为9个
大方格，每个大格面积为1.0mm。容积为
0.1mm（ul），其中，中央大方格用双线分
成25个中方格，位于正中及四角5个中方
格是红细胞计数区域，用单线划分为16个
小方格。
四角的4个大方格是白细胞计数区域，
用单线划分为16个中方格。根椐国际标准< br>局（NBS）规定，大方格每边长度允许误差
为±1%。
计数公式：
25格×16格的血球计数板计算公式：
细胞数ml=（80个小格内细胞个数(即5个中格 的细胞个数)÷80）×400×10000×稀释
倍数
0.1MM=0.1ul=1÷10000ML
3




周测3 选修1 高考题专测
一、选择题 (每题2分，共38分）
1. (2017·江苏高考·T10)下列关于“腐乳的制作”实验,叙述正确的是 ( )
A.控制发酵温度的主要目的是腐乳调味
B.腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐作用
C.毛霉的主要作用是分解脂肪和淀粉
D.成品腐乳表面的粘性物质主要由细菌产生
2.(2018·江苏高考·T16)某高校采用如图所示的发酵罐进行葡萄酒主发酵过程
的研究,下 列叙述错误的是 ( )

A.夏季生产果酒时,常需对罐体进行降温处理
B.乙醇为挥发性物质,故发酵过程中空气的进气量不宜太大
C.正常发酵过程中罐内的压力不会低于大气压
D.可以通过监测发酵过程中残余糖的浓度来决定何时终止发酵
3. (2017·江苏高考·T25)下图是探究果酒与果醋发酵的装置示意图。下列相关
叙述不正确的是( )

A.改变通入气体种类,可以研究呼吸作用类型对发酵的影响
B.果酒发酵中期通入氮气,酵母菌将从有氧呼吸转变为无氧呼吸
C.果醋的发酵周期与实验设定的温度密切相关

D.气体入口与气体出口可以交换使用



二、填空题
4.(2018·全国卷Ⅱ·T37)[生物——选修1:生物技术实践]
在生产、生活和科研实践中,经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。
回答下列问题: (1)在实验室中,玻璃和金属材质的实验器具__________(填“可以”或“不可以”)
放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。
(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法,与煮沸消 毒法相比,这两种
方法的优点是________________________________ ____________________。
(3)密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒,其 原因是紫外线能__________。在
照射前,适量喷洒___________________ _________,可强化消毒效果。
(4)水厂供应的自来水通常是经过__________ ________(填“氯气”“乙醇”或“高
锰酸钾”)消毒的。
(5)某同学在使用高 压蒸汽灭菌锅时,若压力达到设定要求,而锅内并没有达到相
应温度,最可能的原因是________ __________________________________。

5.(2018·全国卷Ⅲ·T37)回答下列与酵母菌有关的问题:
(1)分离培养酵母菌 通常使用__________(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麦芽汁
琼脂”)培养基,该培养基应 采用__________灭菌法灭菌。若将酵母菌划线接种在
平板上,培养一段时间后可观察到菌落, 菌落的含义是____________。
(2)酵母菌液体培养时,若通入氧气,可促进____ ____(填“菌体快速增殖”“乙醇
产生”或“乳酸产生”);若进行厌氧培养,可促进______ __(填“菌体快速增殖”
“乙醇产生”或“乳酸产生”)。
(3)制作面包时,为使面包 松软通常要在面粉中添加一定量的酵母菌,酵母菌引起
面包松软的原因是______________ ______________________。









6.(2018·江苏高考·T31)酵母的蛋 白质含量可达自身干重的一半,可作为饲料蛋
白的来源。有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养 ,这样既可减少污染
又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母,并进行大量培养。如图所示为操作流程,请回答下列问题:

(1)配制培养基时,按照培养基配方准确称 量各组分,将其溶解、定容后,调节培养
基的________,及时对培养基进行分装,并进行___ _____灭菌。
(2)取步骤②中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中,在步骤③中将温
度约________(在25 ℃、50 ℃或80 ℃中选择)的培养基倒入培养皿混匀,冷凝
后倒置培养。
(3)挑取分离平板中长出的单菌 落,按步骤④所示进行划线。下列叙述合理的有
________。
a.为保证无菌操作,接种针、接种环使用前都必须灭菌
b.划线时应避免划破培养基表面,以免不能形成正常菌落
c.挑取菌落时,应挑取多个菌落,分别测定酵母细胞中甲醇的含量
d.可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度,获得甲醇高耐受株
(4)步骤⑤中,为使酵母数 量迅速增加,培养过程中需保证充足的营养和________
供应。为监测酵母的活细胞密度,将发酵 液稀释1 000倍后,经等体积台盼蓝染液
染色,用25×16型血细胞计数板计数5个中格中的细胞 数,理论上________色细

胞的个数应不少于____________,才能达 到每毫升3×10
9
个活细胞的预期密
度。







7.(2017·全国卷甲·T37)豆豉是大豆经过发酵 制成的一种食品。为了研究影响
豆豉发酵效果的因素,某小组将等量的甲、乙两菌种分别接入等量的A、 B两桶煮
熟大豆中并混匀,再将两者置于适宜条件下进行发酵,并在32 h内定期取样观测
发酵效果。回答下列问题:
(1)该实验的自变量是 、 。
(2)如果发现发酵容器内上层大豆的发酵效果比底层的好,说明该发酵菌
是 。
(3)如果在实验后,发现32 h内的发酵效果越来越好,且随发酵时间呈直线上升关
系 ,则无法确定发酵的最佳时间;若要确定最佳发酵时间,还需要做的事情
是 。
(4)从大豆到豆豉,大豆中的成分会发生一定的变化,其中,蛋白质转变
为 ,脂肪转变为 。

8.(2017·全国卷乙·T37)某些土壤 细菌可将尿素分解成CO
2
和NH
3
,供植物吸收
和利用。回答下列 问题:
(1)有些细菌能分解尿素,有些细菌则不能,原因是前者能产生 。
能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO
2
作为碳源,原因
是 ,但可用葡萄糖作为碳源,进入细菌体内的葡
萄糖的主要作用是 (答出两点即可)。
(2)为了筛选可分解尿素的细菌,在配制培养基时,应选择 (填 “尿
素”“NH
4
NO
3
”或“尿素+NH
4
NO
3
”)作为氮源,不选择其他两组的原因
是 。
< br>(3)用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH
2
PO
4
和Na
2
HPO
4
,其作用有
(答出两点即可)。












周测3 选修1

4.答案:(1)可以
(2)在达到消毒目的的同时,营养物质损失较少
(3)破坏DNA结构 消毒液
(4)氯气 (5)未将锅内冷空气排尽

5.答案:(1)麦芽汁琼脂 高压蒸汽 由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞
群体 (2)菌体快速增殖 乙醇产生
(3)酵母菌分解葡萄糖会产生CO
2
,CO
2
使面包松软

6.答案:(1)pH 高压蒸汽(湿热) (2)50 ℃
(3)a、b、d (4)氧气 无 30

7.答案:(1)菌种 发酵时间 (2)好氧菌
(3)延长发酵时间,观测发酵效果,最好的发酵效果所对应的时间即为最佳发酵时
间
(4)氨基酸和肽 脂肪酸和甘油

8.答案:(1)脲酶 分解尿素的细菌是异养生物,不能利用CO
2
合成有机物

为细胞生命活动提供能量,为其他有机物的合成提供原材料
(2)尿素 其他两组都含有NH
4
NO
3
,能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都
能利用NH< br>4
NO
3
,不能起到筛选作用
(3)为细菌生长提供无机营养,作为缓冲剂保持细菌生长过程中pH稳定
9.(2017· 江苏高考·T31)苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中,对环境有严重
危害。小明同学准备依据下图 操作步骤,从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降
解高效菌株。请回答下列问题:

(1)酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K
2
HPO
4
、MgSO
4
、苯酚和水,其中可作为碳源
的有 。
(2)将采集到的样品接种培养,苯酚用量应随转接次数增加而逐渐 ,
以达到富集酚降解菌的目的。若上图平板中菌落过于密集,应进一
步 ,以便于菌落计数与分离。制备平板培养基时除了需要水、营养
物质外,还必须添加 。
(3)下图为连续划线法示意图,在图中 (填图中序号)区域更易获得
单菌落。

(4)采用比色测定法(使用苯酚显色剂)检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作
系列浓度梯度并进行显色反应,下表中1～5号比色管的苯酚浓度应分别
为 。
管号
苯酚浓度(mgL)

如果废水为50 mgL苯酚溶液,降解后约有21%的苯酚残留,则需将残留液稀释
(填序号:①5 ②10 ③20)倍后,再进行比色。
答案:(1)蛋白胨、苯酚 (2)增加 稀释涂布 凝固剂 (3)③
(4)0、0.2、0.4、0.6、0.8 ③

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