FLIP腺病毒表达载体的构建及其在大鼠肺血管内皮细胞中的表达

FLIP腺病毒表达载体的构建及其在大鼠肺血管内皮细胞中
的表达
屈朔瑶;欧 阳海峰;遆新宇;薛彦;吴昌归


【期刊名称】《第四军医大学学报》

【年(卷),期】2009(030)018

【摘要】目的:构建FLIP(FLICE-inhibitory protein)腺病毒表达载体 并观察该载
体在大鼠肺血管内皮细胞(PVEC)中的表达情况,为研究FLIP蛋白的抗凋亡作用打下基础. 方法:利用含有大鼠FLIP基因的原始载体,通过Admax腺病毒包装系
统,构建 表达大鼠FLIP基因的重组腺病毒Ad- FLIP;原代培养并鉴定大鼠PVEC.
利用成功构建的重组腺病毒Ad- FLIP感染大鼠PVEC.通过逆转录酶一多聚酶链
反应(reverse tran- seriptase-polymerase chain reaction,RT- PeR)和
Western Blot分别检测经重组腺病毒Ad- FLIP感染后大鼠PVEC及对照组细
胞中FLIP基凶mRNA和蛋白表达水平. 结果:成功构建含有大鼠FLIP基因的重
组腺病毒Ad-FIJP;经Ⅷ因子间接免疫荧光鉴定原代培 养大鼠PVEC纯度达90%
以上;大鼠PVEC经重组腺病毒Ad-FLIP感染后24 h即检测到FLIP mRNA和
蛋白表达水平明显增高. 结论:重组腺病毒Ad- FLIP可有效提高大鼠PVEC中
FLIP基因的表达水平.

【总页数】3页(1746-1748)

【关键词】FLIP;腺病毒;肺血管内皮细胞;ALIARDS

【作者】屈朔瑶;欧阳海峰;遆新宇;薛彦;吴昌归

【作者单位】第四军医大学西京 医院呼吸内科,陕西,西安,710033;第四军医大学
西京医院呼吸内科,陕西,西安,71003 3;第四军医大学西京医院呼吸内科,陕西,西