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PBS
可以为三种溶液的英文缩写,分别是
1.
磷酸盐缓冲
溶液
(
phosphate buffered solution
)、
2.
磷酸盐缓冲
盐水
(
phosphate buffered saline
)及
3.
磷酸盐缓冲
钠
(
phosphate buffered sodium
),
其配制方法不同,
pH
值不同,发挥 的生物学作用也不完全相同。如无特殊说明,生物学上常用的
PBS
是
中性磷酸盐缓冲 溶液(
phosphate buffered solution
)。
通常用的
PBS
的盐浓度和
PH
是根据动物或人体血浆的 盐浓度来设定的,这种类似液渗透压近似于生理要
求又有较强
pH
缓冲能力的磷酸盐溶 液,有不同的配方。常根据有无钙镁离子分为两类。
常用的
Dulbec co
磷酸缓冲液
(PBSA)
的配方如下:
(g/L
,
pH7.2)
:
KCl 0.20
;
KH
2
PO
4
0.20
;
NaCl 8.00
;
Na
2
HPO
4
·
7H
2
O 2.16
。
因为
PBS
中加入了
Na
2
HPO
4
和
0.24g KH
2
PO
4
,他们能与钙离子和镁离子,金属离子结合生成沉淀。
含钙离子和镁离子
PBS
被称为
杜氏磷酸盐缓冲液(
Dulbecco's Phosphate Buffered Saline
,D-PBS
),与常规
PBS
的不同之处在于磷酸盐的含量稍低些,并含有钙镁离 子。
D-PBS
主要用于胚胎学方面的研究,多用于
胚胎的冲洗液、冻存液和培养液。
D-PBS
配方:
NaCl 8g
,
KCl 0.2g< br>,磷酸氢二钠
1.15g
,磷酸二氢钾
0.2g
,
CaCl< br>2
0.1g
,含
6
个结晶水的氯化
镁
0.1g溶于
1L ddH
2
O
中。
平 时经常使用磷酸盐缓冲液,通常指
PB
,是通过不同比例的
NaH
2
PO
4
和
Na
2
HPO
4
配置不同的
pH
获得一
种缓冲液。磷酸盐有很高的缓冲能力,在水中高度可溶。但是它的主要缺点是:
1.
磷酸盐缓冲液抑制许多酶促反应,而这些酶促反应和步骤恰恰是分子克隆的基 础,其中包括许多限制酶
对
DNA
的切割,
DNA
的连接和细菌转化 等。
2.
因为磷酸盐在乙醇中沉淀,不能用于沉淀
DNA
和
RNA
。
3.
磷酸盐螯合
Ca 2+
和
Mg 2+
这样的阳离子。
磷酸缓冲液配制比例如下
0.2mol/L
pH
值
5.8
5.9
6.0
6.1
6.2
6.3
6.4
6.5
6.6
6.7
6.8
6.9
7.0
7.1
7.2
Na
2
HPO
4
溶液
(
ml
)
8.0
10.0
12.3
15.0
18.5
22.5
26.5
31.5
37.5
43.5
49.0
55.0
61.0
67.0
72.0
0.2mol/L
NaH
2
PO
4
溶液
(
ml
)
92.0
90.0
87.7
85.0
81.5
77.5
73.5
68.5
62.5
56.5
51.0
45.0
39.0
33.0
28.0
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本文更新与2021-01-22 19:59,由作者提供,不代表本网站立场,转载请注明出处:https://www.bjmy2z.cn/gaokao/551239.html