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唾液淀粉酶最适
pH
值的测定实验
实验目的
1
.掌握设计性实验的基本思路,并完成设计报告。
2
.掌握唾液淀粉酶最适
PH
的测定
原理和方法。
3
.熟悉影响酶促反应
速度的因素
。
实验原理
1
.酶促反应速度受到许多因素的影响,如温度、
PH
、激
动剂和抑制剂等。
上述诸因素对唾液淀粉酶催化淀粉水解反应速
度的影响,
可用定性或定量的反应来观察。
利
用碘与淀粉机器不
同程度纾解产物反应的颜色,
来衡量酶促反应
的速度的快慢。
蓝
色—紫红色—黄色,
颜色由蓝变黄,
表示酶促反应速度由慢到快。
此为定性观察。<
/p>
2.
进一步利用郎伯—比尔定律来判定
溶液的吸光度与溶液
的浓度符合一定的比例关系。
由于在被水解
的程度也不一样。
当
唾液淀粉酶不能将完全水解时,
淀粉遇碘呈蓝色,
吸收波长位于
660nm
处。不同
PH
环境中唾液淀粉酶与淀粉的反应
程度不同,
吸光度值也不同。因此,通过测量
660nm
处的吸光度值,可以
了解
PH
对酶促反应的影响,
吸光度最小的溶液其
PH
即为唾液
淀粉酶的最适
PH
。
A
660
PH
最适
PH
实验器材
仪器材料:方盘,试管架,
中试管,毛刷,吸耳球,玻璃铅笔,
小烧杯,
白瓷板,
坐标纸,
漱口杯。
0.1ml
< br>、
0.5ml
、
1.0ml
p>
、
2.0ml
、
5
.0ml
、
10.0ml
刻度吸管,胶
头滴管,
37
C
恒温水浴箱,分光光
度计,电磁炉。
试剂药品:
0.02
%淀粉溶液
. 0.2mol
/L
磷酸二氢钠溶液、
0.2mol/L
磷酸氢二钠溶液
碘液;称取碘<
/p>
1g,
碘酸钾
2g
,溶于
300ml
蒸馏
水中。
实验步骤:
1
、
缓冲液的配置
pH
0.2mol/L
0.2mol/L
NaH
2
PO
4
(ml)
Na
2<
/p>
HPO
4
(ml)
5.7
5.8
5.9
6.0
6.1
6.2
6.3
6.4
6.5
6.6
6.7
6.8
93.5
92.0
90.0
87.7
85.0
81.5
77.5
73.5
68.5
62.5
56.5
51.0
6.5
8.0
10.0
12.3
15.0
18.5
22.5
26.5
31.5
37.5
43.5
49.0
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