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石蜡切片制作
大致步骤：
取材、
固定、
洗涤和脱水、
透明、
浸蜡、
包埋、
切片和粘片、
脱蜡、
染色、
脱水、
透明
、封片等步骤。
1
、
取材
植物材料选择时必须尽可能不损伤植物体或所需要的部分。
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取材必须新鲜，尽可能割取所需要的组织块，并随即投入固定液。
取材时刀要锐利，避免因挤压细胞使其受到损伤。
切取的材料应该小而薄，
便于固定剂迅速渗入内部。
一般厚度不超过
2mm
，
大小不超过
5*5mm2
。
2
、
固定
用适当的化学药液—固定液浸渍
切成小块的新鲜材料，
迅速凝固或沉淀细胞和组织中的物质
成分
、终止细胞的一切代谢过程、防止细胞自溶或组织变化，尽可能保持其活体时的结构。
固定液的选用：
FAA
固定液
FAA
固定液
配制：福尔马林（
38%
甲醛）
5
ml
冰醋酸
5 ml
70%
酒精
90 ml
5 ml
甘油（丙三醇）
固定时间根据材料块的大小及松密程度而定。
3
、
洗涤与脱水
固定后的组织材料需要除
去留在组织内的固定液及其结晶沉淀，
否则会影响以后的染色效果。
多数用流水冲洗：
使用含有苦味酸的固定液固定的则需要用酒精多次浸洗；
如果组织经酒精
或酒精混合液固定，则不必洗涤，可直接进行脱水。
酒精为常用的脱水剂，
为了减少组织材料
的急剧收缩，
应使用从低浓度到高浓度递增的顺序
进行，通常从
30%
或
50%
酒精开始，经
70%
、
85%
、
95%
直至纯酒精（无水乙醇）
，每次时间为
1-
数小时，如不能及时进行脱水，
材料可以放在
70%
酒精中保存，因高浓度酒精易使组织收
缩硬化。
4
、
透明
选用二甲苯为酒精和石蜡的浸媒
液，
替换出组织内的酒精。
通常组织先经过纯酒精和透明剂
各半的混合液浸渍
1-2
小时，再转入纯透
明剂中浸渍。时间根据材料块大小而定。
5
、
浸蜡与包埋
用石蜡取代透明剂，
使石蜡浸入组织而起支持作用。
通常把组织材料块放在熔化的石蜡和
二
甲苯的等量混合液浸渍
1-2
小时，
再先后移入
2
个熔化的石蜡液中浸渍<
/p>
3
小时左右，
浸蜡应
在高于石蜡熔点
3
℃左右的温箱中进行，以利于石蜡浸入组
织内。浸蜡后的组织材料块放在
装有蜡液的容器中（摆好在蜡中的位置）
，待蜡液表层凝固即迅速放入冷水中冷却，即做成
含有组织块的蜡块。
容器可用光亮且厚的纸折叠成纸盒或金属包埋框盒。
如果包埋的组织块<
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数量多，应进行编号，以免差错。石蜡熔化后应在蜡箱内过滤后使用，
以免因含有杂质而影
响切片质量，且可能损伤切片刀。
6
、
切片
包埋好的蜡块用刀片修成规整的
四棱台，
以少许热蜡液将其底部迅速贴附于小木块上，
夹在
轮转式切片机的蜡块钳内，使蜡块切面与切片刀刃平行，
旋紧。切片
刀的锐利与否、蜡块硬
度适当都直接影响切片质量，可用热水或冷水等方法适当改变蜡块
硬度。通常切片厚度为
4-7
微米，切出一片接一片的蜡带，用
毛笔轻托轻放在纸上。
7
、
贴片与烤片